Codice: UNI EN ISO 11731:2017
La UNI EN ISO 11731:2017 (Qualità dell'acqua — Enumerazione di Legionella) è la norma tecnica internazionale per il conteggio di Legionella nelle acque, metodo colturale di riferimento per le verifiche obbligatorie, che sostituisce e aggiorna le versioni del 1998 e del 2008.
Filtrazione su membrana, pretrattamenti termico/acido, semina su terreno selettivo (BCYE), incubazione 7-10 giorni a 37 °C.
Conferma morfologica, biochimica e sierologica dei sospetti; identificazione della specie e sierogruppo.
Tipicamente 10 UFC/L per acqua sanitaria; 50 UFC/L per matrici complesse.
Risultato in UFC/L con indicazione del sierogruppo e del limite di rilevabilità.
Lettura guidata degli articoli e allegati principali, con sintesi del testo ufficiale e commento pratico per capire cosa cambia davvero per la tua struttura.
Specifica i metodi colturali per l’isolamento di Legionella e la stima della carica in campioni d’acqua, applicabili a qualsiasi tipo di acqua e a matrici correlate come biofilm e sedimenti.
Definisce dove si applica il metodo: non solo acqua sanitaria, ma anche matrici complesse, utile quando il prelievo riguarda torri o serbatoi.
Fonte: UNI EN ISO 11731:2017, Sezione 1 (Scopo e campo di applicazione)
Prevede contenitori sterili con tiosolfato per neutralizzare i biocidi residui (es. cloro) e condizioni di trasporto e conservazione che preservino la vitalità dei batteri.
Il prelievo corretto è metà del risultato: senza neutralizzazione del cloro o con trasporto scorretto si ottengono falsi negativi.
Fonte: UNI EN ISO 11731:2017, § Campionamento (prelievo e conservazione)
Per migliorare la sensibilità il campione viene concentrato per filtrazione su membrana, con eluizione o deposizione diretta della membrana sul terreno.
La concentrazione abbassa il limite di rilevabilità: è ciò che permette di trovare basse cariche di Legionella in acqua relativamente pulita.
Fonte: UNI EN ISO 11731:2017, § Concentrazione (filtrazione su membrana)
Descrive i pretrattamenti termico e acido per ridurre la flora batterica interferente e favorire la crescita selettiva delle Legionella.
Servono ad abbattere i contaminanti che maschererebbero le colonie: passaggio chiave per la leggibilità delle piastre.
Fonte: UNI EN ISO 11731:2017, § Pretrattamenti (termico e acido)
Prevede la semina su terreno BCYE e terreni selettivi (es. GVPC), con incubazione a circa 36 ± 2 °C per 7-10 giorni in ambiente umido e letture seriate.
Spiega perché il referto richiede 10-12 giorni: l’incubazione colturale non è comprimibile, a differenza dei test rapidi di screening.
Fonte: UNI EN ISO 11731:2017, § Semina e incubazione (terreni BCYE/GVPC)
Le colonie sospette sono confermate per crescita cisteina-dipendente e identificate per specie e sierogruppo (incluso L. pneumophila sierogruppo 1).
La conferma evita falsi positivi e distingue il sierogruppo 1, il più virulento: dato decisivo per la valutazione del rischio.
Fonte: UNI EN ISO 11731:2017, § Conferma e identificazione
Il risultato è espresso come UFC per litro (o per 100 mL), con indicazione del limite di rilevabilità e del sierogruppo identificato.
Le UFC/L del referto sono i numeri che confronti con le soglie di azione delle Linee Guida 2015 per decidere se bonificare.
Fonte: UNI EN ISO 11731:2017, § Espressione dei risultati
Interpreta il refertoUsa contenitori sterili con tiosolfato per neutralizzare i biocidi residui come il cloro e garantisci condizioni di trasporto e conservazione che preservino la vitalità dei batteri.
Migliora la sensibilità concentrando il campione per filtrazione su membrana, con eluizione o deposizione diretta della membrana sul terreno.
Riduci la flora batterica interferente con i pretrattamenti termico e acido per favorire la crescita selettiva delle Legionella.
Semina su terreno BCYE e terreni selettivi, incuba a circa 36 ± 2 °C per 7-10 giorni e conferma le colonie sospette identificando specie e sierogruppo.
Esprimi il risultato come UFC per litro (o per 100 mL) indicando il limite di rilevabilità e il sierogruppo, da confrontare con le soglie delle Linee Guida 2015.
La qPCR è utile come screening rapido, ma il riferimento ufficiale per la conformità resta il metodo colturale UNI EN ISO 11731.
È opportuno scegliere un laboratorio qualificato che applichi la UNI EN ISO 11731 con metodi validati conformi a norme tecniche; il referto è utilizzabile per pratiche con ASL e autorità competenti (ammissibilità valutata dall’autorità competente).
In genere 7-10 giorni di incubazione, più conferma. Il referto è disponibile in circa 10-12 giorni lavorativi.
Almeno Legionella pneumophila sierogruppo 1 (più virulento) e altri sierogruppi 2-14, oltre a Legionella spp. non pneumophila.
Sì, deve essere riportata nel referto secondo le buone pratiche tecniche del metodo.
123Acqua è un laboratorio qualificato e applica la UNI EN ISO 11731:2017 per le analisi Legionella, con refertazione completa di sierogruppi.
Analisi LegionellaScheda aggiornata il .