Cos'e' il LOQ (limite di quantificazione)?

LOQ (Limit of Quantification) e LOD (Limit of Detection) sono spesso confusi ma sono concetti diversi e cruciali per leggere correttamente un referto. Il LOD e' il valore minimo a cui si puo' dire con sicurezza che il composto e' presente; il LOQ e' il valore minimo a cui si puo' anche dire quanto ce n'e', con incertezza accettabile. Entrambi sono parametri di prestazione del metodo, validati e dichiarati nello scopo di accreditamento.

Definizioni operative

• LOD (Limit of Detection): segnale >= 3 volte il rumore di fondo del metodo
• LOQ (Limit of Quantification): segnale >= 10 volte il rumore di fondo, RSD <20%
• Limite di legge: valore parametrico fissato dalla normativa (es. D.Lgs. 18/2023)
• Range di lavoro: intervallo tra LOQ e limite superiore di linearita validato
• Incertezza di misura: U=2sigma associata al risultato (intervallo di confidenza 95%)
• Recupero: percentuale di analita riacquisito su spike di matrice (target 70-130%)

Perche il LOQ deve essere inferiore al limite di legge

Se un metodo ha LOQ di 0,2 ug/L per il piombo, ma il limite di legge e' 5 ug/L (e dal 2036 sara' 5 ug/L per il D.Lgs. 18/2023), il metodo e' ampiamente adeguato. Se invece un metodo ha LOQ di 10 ng/L per i PFAS singoli mentre la somma deve stare sotto 100 ng/L (somma 20 PFAS), il margine si riduce e per i singoli PFOA con limite EFSA di 4 ng/L il metodo non puo' dimostrare la conformita' nemmeno teoricamente. Per questo e' essenziale che il laboratorio dichiari il LOQ nel referto.

Esempi di LOQ vs limiti normativi

Come si determina il LOQ

1. Si analizzano repliche (n=10) di un bianco di matrice per stimare il rumore di fondo
2. Si calcola la deviazione standard del bianco (sigma_blank)
3. Si stima LOQ = 10 x sigma_blank o si verifica empiricamente con campioni a bassa concentrazione
4. Si conferma in matrice con CRM o spike a livello attorno al LOQ atteso
5. Si valida che a quel livello la precisione (RSD) sia <20% e il recupero 70-130%
6. Si riporta il LOQ nel manuale qualita e nello scopo di accreditamento
7. Si verifica annualmente con ripetizione della validazione su almeno 5 sessioni

Incertezza di misura e arrotondamenti

Ogni risultato analitico e' accompagnato dall'incertezza estesa, calcolata secondo la guida EURACHEM/CITAC CG4 (Quantifying Uncertainty in Analytical Measurement). Per esempio: PFOS = 12 +/- 3 ng/L significa che il valore vero, con probabilita' 95%, e' compreso tra 9 e 15 ng/L. Quando si confronta con un limite (es. 100 ng/L) si valuta sia il valore puntuale sia la possibilita' che l'incertezza superi il limite, e nel referto evidenziamo i casi borderline. La regola di decisione segue la norma ISO/IEC Guide 98-4:2012.

Differenza tra LOQ strumentale e LOQ di metodo

Il LOQ strumentale e' la quantita' minima quantificabile dal solo strumento (in genere espressa in pg iniettati). Il LOQ di metodo include tutti i fattori di concentrazione e diluizione: per esempio se concentro 250x con SPE, il LOQ di metodo sara' 250 volte piu' basso del LOQ strumentale. Il LOQ riportato nel referto e' sempre il LOQ di metodo, perche' e' quello che effettivamente determina la sensibilita' analitica per il cliente.

Lettura pratica di un referto

Quando ricevi un referto, oltre al valore numerico controlla sempre: (a) l'unita' di misura (ng/L, ug/L, mg/L); (b) il LOQ dichiarato per ciascun parametro; (c) il limite normativo di riferimento; (d) l'incertezza estesa associata al valore; (e) la dicitura accreditato o non accreditato accanto al risultato; (f) il metodo di prova citato (es. EPA 533, ISO 11731). Senza questi cinque elementi non e' possibile interpretare correttamente il dato analitico.